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奥拉帕尼/奥拉帕利诱导FOXM1和HR修复基因的表达
时间:2020-12-17
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来源:本站原创

  奥拉帕尼(奥拉帕利)诱导FOXM1和HR修复基因的表达  

  为了确定FOXM1在奥拉帕尼(奥拉帕利)诱导的适应性细胞应答中的潜在作用,我们用奥拉帕尼(奥拉帕利)处理卵巢癌ES-2和OVCA420*,测定FOXM1、BRCA1和RAD51在不同时间点的表达。我们观察到奥拉帕尼(奥拉帕利)在6小时内诱导FOXM1的表达。除了FOXM1表达上调外,在奥拉帕尼(奥拉帕利)处理后3小时内还观察到FOXM1的核位置增加,这表明ofFOXM1通路被激活。

奥拉帕尼,奥拉帕利  

  随着FOXM1通路的激活,我们观察到这些细胞中BRCA1和rad51的表达增加。FOXM1的核定位增加,FOXM1与其靶基因BRCA1、RAD51、FANCF、RAD51D和FANCD2等启动子区域的结合在奥拉帕尼(奥拉帕利)处理后12小时和24小时增加。这些数据表明,FOXM1在卵巢癌细胞对奥拉帕尼(奥拉帕利)治疗的适应性细胞反应中发挥重要作用。  

  FOXM1在对奥拉帕尼(奥拉帕利)反应较弱的癌细胞中表达较高  

  为了确定FOXM1的表达与奥拉帕尼(奥拉帕利)敏感性的相关性,我们通过qRT-PCR、Westernblot分析和SRB分析来评估FOXM1的表达和奥拉帕尼(奥拉帕利)敏感性。尽管FOXM1的所有三种形式都得到了表达,FOXM1C转录本水平更好地反映蛋白表达。与这些结果相一致的是,对CancerGenomeAtlas卵巢癌数据集的分析表明,FOXM1C转录本是三种亚型中最丰富的,这与Tassi和同事的一份报告相一致。这些细胞系奥拉帕尼(奥拉帕利)敏感性的剂量-响应曲线表明,FOXM1高表达的OVCA420*和OV90对奥拉帕尼(奥拉帕利)的敏感性较低。综上所述,这些结果表明FOXM1在卵巢癌细胞奥拉帕尼(奥拉帕利)敏感性中的潜在作用。  

  FOXM1敲除可增强对奥拉帕尼(奥拉帕利)的敏感性  

  为了确定FOXM1的表达在多大程度上影响奥拉帕尼(奥拉帕利)敏感性,我们使用了两种不同的siRNAs来下调FOXM1的表达。尽管这两种siRNAs都下调了FOXM1转录的所有三种亚型,但FOXM1B更容易受到这些siRNAs的影响。有趣的是,FOXM1的表达在蛋白水平上显著降低,表明这些siRNAs也影响了FOXM1蛋白,这与某些siRNAs的翻译抑制一致。  

  SRB检测表明FOXM1表达降低的细胞对奥拉帕尼(奥拉帕利)明显更敏感。同样,我们观察到,在FOXM1下调的细胞中,使用4、10和25mol/L奥拉帕尼(奥拉帕利)处理的细胞与搅乱的对照siRNA。接下来,我们使用药理学手段抑制FOXM1的表达,并确定FOXM1的抑制在多大程度上增强了对奥拉帕尼(奥拉帕利)的敏感性。  

  Thiostrepton是一种FOXM1抑制剂,可下调FOXM1的表达。在三种不同的卵巢癌细胞系中,我们观察到在克隆试验中检测的浓度下硫代strepton和奥拉帕尼(奥拉帕利)之间的协同作用和SRB试验中温和的协同活性。同样,我们观察到硫strepton与奥拉帕尼(奥拉帕利)或卡铂在其他癌细胞系中的协同作用。总的来说,这些结果表明FOXM1抑制增强了对奥拉帕尼(奥拉帕利)和卡铂的敏感性。奥拉帕尼(奥拉帕利)去哪儿购买呢?详情请扫码咨询: